作者：张效良，李苌青，殷秀，谢勇恩，沈成义，黄丹丹，林丽
【摘要】 目的 以透明质酸为基质，研制对胃黏膜屏障更具保护作用的新制剂，探索透明质酸对黏膜的保护作用，拓展透明质酸新的应用范围。方法 复制大鼠应激性胃黏膜急性出血性糜烂损伤的动物模型，制定胃黏膜损伤程度分级标准和研究制剂有效性判定标准。实验前对实验组动物灌饲研究制剂3ml，对照组以等量生理盐水灌胃。同时设立模型对照组验证模型。24h后处死动物观察胃黏膜外观形态变化；切片观察胃黏膜病理组织学改变。结果 实验组胃黏膜外观良好，未见明显黏膜糜烂和出血灶；对照组则可见散在出血点和黏膜完整性的破坏；模型对照组出现全胃广泛出血，黏膜表面覆盖大量凝血块。实验组有效率为90%；对照组有效率为22%。统计学检验，P＜0.05。结论 实验结果显示“胃屏复”对应激性胃黏膜损伤具有明显的保护作用。由此表明，透明质酸可替代胃黏膜屏障的糖蛋白基质而具有重要的应用开发价值。
【关键词】 透明质酸；制剂；形态学观察；动物模型
Preparation of protecting gastromucosa and observation its effect on protecting of acute stress gastromucosa damage in rats
【Abstract】 Objective Used hyaluronic acid as matrix， WEIPINGFU， a new preparation of protecting gastromucosa，was studied.Methods The animal model of acute stress gastromucosa damage was reconstructed. The standards of the gastromucosa damage and the protecting effect was worked out. The animals of experimental group were poured the WEIPINGFU 3ml into the stomach，and NS 3ml were poured into it in contrast group before the experiment. The animals were treated after 24 hours，then the changes of the gastromucosal morphology and pathologic histology were observed.Results The appearance of gastromucosa was fine and intact；there weren’t obvious gastromucosal erosion and bleeding points in the experimental group. It was seen a lot of spread bleeding points and destroy of gastromucosa in the contrast group. The effective rate of the former is 90%；but the latter is 22%(P＜0.05).Conclusion The test preparation has clearly the protecting effect to the gastromucosa damage.
【Key words】 hyaluronic acid；preparation；morphologic observation；animal model
胃炎、胃黏膜糜烂、出血、胃溃疡等疾病是危害人类健康的常见病、多发病。而不同病因导致胃病变具有共性的特征是胃黏膜屏障的受损。目前市售的许多药品也正是基于保护和修复受损胃黏膜屏障而发挥治疗作用。因此，人们从未停息对胃黏膜屏障更具保护作用的新型材料和制剂的研究和探索。本项研究就是以透明质酸为基质，佐以胃黏膜细胞营养剂等物质而研制的类似天然胃黏膜屏障理化性质的一种新型制剂（关于制剂的理化特征和药剂学资料另文发表）。为了便于表述，暂将该制剂定名为“胃屏复”。众所周知，正常胃黏膜屏障是由胃上皮细胞、泌酸腺的黏液颈细胞和贲门、幽门腺共同分泌的以糖蛋白和碳酸氢盐为主要成分的凝胶构成。它在胃表面形成厚度约500μm的凝胶层，一方面减少粗糙食物对胃黏膜的机械性损伤；另一方面有效地保护胃黏膜免受胃酸和胃蛋白酶的损害。本研究制剂的基质透明质酸是广泛存在于动物体内的一类大分子粘多糖，在溶液中，因其分子存在众多交联键而形成分子网状结构，这就使透明质酸溶液同时具有凝胶弹性和溶液粘性的双重特性［1］。这种特征与正常胃黏膜屏障的糖蛋白基质十分类似。因此，探索和研究透明质酸治疗胃疾病是对此类大分子粘多糖应用领域的新的拓展。目前也尚未查见类似报道。
1 材料与方法
1.1 动物 SD大鼠，雌雄不限，平均体重120g（购自四川大学华西医学中心）。
1.2 研究制剂 本研究制剂基质为人脐带透明质酸，本室提取，理化特性达到制剂标准［2］。其他试剂均为国产分析纯。
1.3 动物模型复制及标本处理［3］ 大鼠于实验前禁食48h，仰缚于鼠板，浸入20℃左右水中，水面高度平剑突。24h后麻醉处死。剖开腹腔，在幽门和十二指肠连接处穿线结扎。然后通过食道注入0.4%中性福尔马林8ml到胃内，结扎食道。切断食道和十二指肠摘出全胃。30min后，沿胃大弯将胃切开，平铺观察胃黏膜变化。最后将标本固定于5%福尔马林待切片镜下观察。