作者:许奇齐，李玫，王松霞，薛殷彤
【摘要】 目的 依据T细胞的发育机制理论，诱导针对移植物特抗原的异性免疫耐受。方法 先用致死剂量的γ射线，将受者的T细胞及干细胞去除，形成了一个不具干细胞、前T细胞和T细胞的受者模型，称受者模型Ⅰ。同时经同种皮肤移植制造正常的受者对供者器官的免疫排斥反应的模型，称模型Ⅱ。从模型Ⅱ中经免疫磁珠分选取得被供者抗原所激活的、具有抗原提呈功能的树突状细胞，与正常的事先准备好的受者骨髓细胞在体外混合后回输至受者模型Ⅰ中。受者Ⅰ完成免疫造血功能重建后，再对其行同种皮肤移植。分5组，分别观察移植皮片的存活时间，并常规病理组织切片和流式细胞分析检测。结果 由T细胞发育的上游诱导产生特异性的免疫移植耐受，比较对照组，实验组皮片存活时间显著延长（P＜0.005），流式细胞分析和病理组织学分析差异也有显著性。结论 在所建立的模型和系统中，能诱导移植物特异性的免疫耐受，也进一步验证了胸腺的阴性选择理论。
【关键词】 树突状细胞；移植；耐受；胸腺；T细胞发育
Induction of transplantation tolerance with allograft-activated host dendritic cells
【Abstract】 Objective The negative thymic selection is critical for the maturation of bone marrow derived cells to T cells.Negative selection occurs in thymic medulla and is normally mediated by bone marrow derived APC，like dendritic cells (DC) or macrophages.Immunodominant allopeptide-pulsed host dendritic cells can successfully induce transplantation tolerance.Methods Host dendritic cells were activated by allo-skin transplantation on day -10 to present the donor-specific antigens.Murine recipients of allogeneic skin grafts on day 0 were given transfusion of these activated dendritic cells and isogeneic bone marrow cells after lethal irradiation.Results Transfusion of donor-antigen-specific activated host dendritic cells plus isogeneic bone marrow cells led to prolonged skin allograft survival in recipients treated with lethal irradiation.In contrast，bone marrow cells transfusion alone failed to induce donor-specific tolerance.Conclusion In the absence of chronic immunosuppression，transfusion of donor antigens activated dendritic cells can prolong skin allograft survival markedly.
【Key words】 T cell development；dendritic cells；transplantation；tolerance；thymus
器官移植在人造组织、器官成功应用之前仍然是挽救某些不可逆病变的最优的治疗手段。而造成移植手段失败的主要原因是由于移植后的排斥反应造成［1］。发展更为精细的组织配型以及大量新的免疫抑制药物的开发与应用是目前国内外对付排斥反应的手段。但是，移植供体的局限性必将导致HLA配型的局限性；而免疫抑制剂的毒性和副作用又限制了其长期和大量的应用［2，3］。因此，如何克服免疫排斥反应目前仍然是国内外外科学家和医生急于探讨和急需解决的课题。诱导移植受体对供体器官产生特异性免疫耐受可以避免长期应用免疫抑制药物所引起的非特异性免疫抑制及其他毒副作用，被认为是防止器官移植排斥的理想方法［4～6］。
Ｔ细胞，是介导细胞和体液免疫反应的核心细胞，也是排斥反应中的核心细胞。如果能使Ｔ细胞对于移植供体产生免疫耐受，将成为解决排斥反应的有效方法。但是，由于外周ＴＣＲ库的丰富内涵，以及供体组织器官的抗原多样性，使得诱发外周Ｔ细胞对于移植产生耐受的方案具有相当的难度，至今在国内外的解决办法也就是应用一些T细胞的抑制剂。为此，我们设计新的技术路线，要寻求出一种方法，既能诱导出T细胞对供体组织器官的耐受，而又能保持T细胞的正常免疫功能，以期待得到解决此问题的理想方案。众所周知，外周不同的Ｔ细胞和TCR都是源于相同的骨髓来源的前T细胞，其多样性是在胸腺发育过程中通过TCR基因重排而产生的，而其自身免疫耐受主要是产生于T细胞在胸腺发育过程中的阴性选择，通过阴性选择，克隆清除自身反应性T淋巴细胞，这是中枢耐受的主要机制之一［7，8］；最新的研究还发现，非删除性的耐受在中枢耐受中也有着极其重要的作用，主要包括CD4+、CD8+调节性T细胞Treg的作用［5，6］；S.F.Oluwole等［9，10］发现通过胸腺内给与提呈供者MHC多肽的激活的DCs能诱导移植物特异性免疫耐受，同时，通过外周静脉途径，也能诱导类似的耐受，进一步研究表明其耐受形成机制可能是由于体内同种MHC激活的同种反应性T细胞回流入胸腺所致，这些抗原特异性激活的反应性T细胞能从血流进入胸腺，对于维持获得性的免疫耐受至关重要。如果能够从T细胞发育的上游部位，造成T细胞发育的选择，即选择对移植物的耐受，将可能成为克服排斥，成就无毒无害之免疫耐受的有效方案。
1 材料与方法