慢支咳喘灵对免疫低下小鼠免疫功能的影响
慢支咳喘灵对免疫低下小鼠免疫功能的影响
作者;肖波，刘晖，陈康桂，凌翠
［摘要］ 目的 探讨慢支咳喘灵对免叩拖滦∈竺庖吖δ艿挠跋臁?STRONG>方法 制备免疫低下功能模型小鼠，给予慢支咳喘灵，14天后进行免疫功能的测定。结果 中、高剂量的慢支咳喘灵应用后均可使免疫功能低下小鼠的体重、胸腺和脾脏重量显著增加（P<0.05或P<0.01）''但小剂量组作用不甚明显。与模型组比较，慢支咳喘灵中、高剂量具有显著促进吞噬作用（P<0.05或P<0.01）；高剂量时的吞噬作用和正常对照组差异无显著性（P>0.05），但小剂量组作用不甚明显；高、中、低3个剂量组的慢支咳喘灵对小鼠迟发型变态反应均有显著的抑制作用（P<0.05或P<0.01），可显著提高血清溶血素水平（P<0.05或P<0.01）。结论 慢支咳喘灵可提高机体的免疫功能。
［关键词］ 慢支咳喘灵；免疫低下；小鼠；免疫功能
慢支咳喘灵口服液（以下简称慢支咳喘灵）主要由生晒参、茯苓、淮山、黄芪、麦冬、川贝、胎盘、蛤蚧等20多味中药组成，临床主要用于治疗慢性阻塞性肺疾病（COPD）患者［1］。本研究通过其对免疫低下小鼠免疫功能的影响，为其临床应用提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 药品与试剂 慢支咳喘灵口服液（MZK），本院制剂室自制；氢化可的松注射液（Hy）由上海信谊药厂生产（批号040313）。鸡红细胞悬液（CRBC）的制备［2］：于无菌操作下，自鸡翼下静脉取血''在4 ℃冰箱于Alsever氏液中保存，临用时用生理盐水洗涤3次'' 2000 rpm离心10 min得压积鸡红细胞''再按所需浓度稀释。补体：以3只豚鼠血液离心提取血清''配成10生理盐水溶液。1%二硝基氯苯（DNCB）溶液:每次致敏或攻击前新鲜配制1%DNCB丙酮麻油溶液（丙酮∶麻油为1∶1）5 ml倒入小瓶内''盖好并用胶布封口''备用。
1.2 仪器 721型分光光度计''上海分析仪器厂。
1.3 动物 SPF级KM小鼠，体重18～22 g，雌雄各半（合格证号为2004A027）由广东医学院实验动物中心提供。实验室温度（23±2）℃''相对湿度40%～70%，常规饲料喂养''自由饮水。
1.4 动物分组与免疫低下模型小鼠的制备 除正常对照组外，其余小鼠均给予Hy造模，末次注射后记录小鼠体重''将免疫低下小鼠按体重随机等分4组：模型组和高、中、低药物组。药物组分别按0.03、0.06和0.12 ml/kg灌胃给药（分别相当于临床等效量、2倍量和4倍量）给予慢支咳喘灵口服液，正常对照组和模型组均给予蒸馏水，每天给药1次，连续14天。
1.5 免疫低下功能模型小鼠的制备方法［3］ 按20 mg/kg腹腔注射Hy'' 隔天1次''共5次。在注射Hy期间''动物逐渐出现体重减轻、活动减少、反应迟钝、蜷缩弓背、毛松等免疫低下的体征''正常组小鼠无明显变化。
1.6 实验数据的处理 采用中国数学药理学会提供的NDST软件进行方差分析。
2 结果
2.1 对小鼠体重、胸腺和脾重的影响 60只小鼠，按上述方法进行造模、分组和用药。第15天处死小鼠称重，并取胸腺和脾脏称重。结果发现Hy可使小鼠的体重显著降低，比正常组下降了31.5%'' P<0.01）；胸腺和脾脏显著萎缩，其重量分别为正常组小鼠的46.6%和24.8%（P<0.01）。中、高剂量的慢支咳喘灵应用后均可使免疫功能低下小鼠的体重、胸腺和脾脏重量显著增加（P<0.05或P<0.01）''但小剂量组作用不甚明显。结果见表1。
表1 慢支咳喘灵对小鼠体重、胸腺和脾重的影响 （x±s,n=12）
注：与正常对照组比较，*P<0.05''**P<0.01；与模型组比较，ΔP<0.05，ΔΔP<0.01
2.2 对小鼠单核细胞吞噬炭粒能力的影响 参照小鼠炭粒廓清法［2］取小鼠60只'' 按上述方法进行造模、分组和用药。各组末次给药后1h''于小鼠尾静脉注入12.5%中华墨汁0.1%ml/10g''分别于注墨汁后1 min及5 min''分别用特制的取血吸管从小鼠眼眶后静脉取血0.025 ml''立刻吹入0.1Na2CO3液2 ml中''吹吸吸管数次''洗净吸管壁附着之血''取血完毕后''再取0.025 ml正常小鼠之血溶于2.0 ml Na2CO3液中校零''于紫外可分光光度计680 nm处比色''按下式计算吞噬指数K及吞噬系数（校正吞噬指数）α:
K=lgC1-lgC2 T2-T3 α=W WLSS K
（W为体重''WLS为肝脾合重）
结果