26蜂毒肽与IL-2嵌合蛋白对体外培养的HeLa细胞生长的影响
26蜂毒肽与IL-2嵌合蛋白对体外培养的HeLa细胞生长的影响
表1 嵌合蛋白对HeLa细胞增殖抑制率的影响
2.2 倒置显微镜观察 阴性对照组HeLa细胞生长良好，细胞伸展，呈不规则多角形。实验组培养24h后
HeLa细胞数目减少，随着时间的推移，细胞明显皱缩，浆内出现空泡，胞内颗粒增多，培养液中有许多漂浮的
呈桑叶状细胞，72h后上述改变更为明显。
3 讨论
本实验选用通用癌细胞株HeLa细胞，并以正常人二倍体成纤维细胞作对照，应用MTT法研究了嵌合蛋白对HeLa细胞生长的影响。实验结果表明，嵌合蛋白对HeLa细胞的生长有抑制作用，10mg/L的嵌合蛋白对HeLa细胞有明显的抑制作用，且随浓度及时间的增加抑制作用增强。同样条件下嵌合蛋白对正常人二倍体成纤维细胞的影响不明显。光镜观察结果显示嵌合蛋白作用24h后细胞出现形态学改变且随时间的增加更为明显。
分子生物学研究表明，蜂毒肽具有膜活性特点，与膜作用时，随着时间的变化， 四聚体衰变为稳定的三聚体和单体。这个持续的构型变化将伴随着含水孔的横向扩张，主要由α-螺旋之间的静电排斥造成孔增加，因此细胞裂解［5］。蜂毒肽具有对肿瘤细胞的选择性杀灭作用，又具有相对分子量小、热稳定性、无免疫原性等特点。IL-2是TC的淋巴因子，它能够增强LAK及NK细胞肿瘤杀伤活性［6，7］，具有高效的抗肿瘤作用。嵌合蛋白没有破坏IL-2的重要决定簇，同时降低了蜂毒肽的毒性，嵌合蛋白能协同IL-2与蜂毒肽增强细胞免疫的作用，能特异并高效激活CTL对肿瘤细胞的杀伤。它基本保留了抗肿瘤效应，同时减轻了蜂毒素、IL-2对正常细胞的毒性，这种独特的双重作用有利于肿瘤病人的综合治疗和康复。嵌合蛋白作为一种高效、低毒的抗肿瘤药物，其确切的作用机制有待于进一步深入研究。
【参考文献】
1 Marek J ， Werner J P ， Dejan S ， et al. Bee venom immunotherapy results in decrease of IL24 and increase of IFN2 γ seccretion in specific allergen stimulated T cell cultures. J Immunology ， 1995 ， 4178 :154.
2 Lowy PH，M Itchell HK， T Racy UW. Bee venom phospholipase A 2; effects on drosophila larval， HeLa cells and membranes. Toxicin， 1976， 14 (3) : 2032212.
3 Henney CS，GallO K. Interleukin-2 augments natural killer cell activity. Nature， 1981，291:335-338.
4 Gillis S，Smith KA. Long term culture of tumor-specific cytotoxic T cells. Nature， 1977，268:154-156.
5 Yang S，Carrasquer G. 中国药理学报，1997 ，18(1) :3-5.
6 Aronson FR ，Libvby P ，Brandon EP， et al . IL - 2 rapidly induces natural killer cells adhesion to human endothelial cells. J Immunol ，1998 ，141 : 158-163.
7 Asano Y，Tada T. Generation of T cell repetition two distinct mechanisms for generation of T supressor cell T helper cells and T segmenting cells. J Immunol ，1998 ，142 :365 :373