去甲硫氨酸环境对胃癌化疗疗效的作用
去甲硫氨酸环境对胃癌化疗疗效的作用
1.2.6 MTT法测试 用自动酶标仪（318—Microplate Reader)比色，波长492nm，得到每孔的光密度值（OD），每组取3孔的平均值，表示该组活细胞的数量。
1.3 统计学方法 用配对t检验比较同一药物、同一肿瘤细胞在不同培养基中生长的受抑程度。以P<0.05为差异有显著性。
2 结果
不同培养基联合化疗药物对人胃癌原代细胞生长的影响。5-FU、DDP分别加入Met-Hcy+培养基和Met+Hcy-培养基后，上述化疗药物中的无论哪一种加入Met-Hcy+后，其对胃癌细胞生长的抑制作用都较加入Met+Hcy-的各组为显著（P<0.05），表现为胃癌活细胞数不同程度减少，OD值降低，见表2。
表2 化疗药物联合不同培养液对胃癌细胞的生长影响 （x±s，μmol/L）
3 讨论
化疗在恶性肿瘤治疗过程中具有不可替代的地位。化疗成功与否，对病人的生存期和生活质量具有重要影响。胃肠道肿瘤多属化疗中等敏感的恶性肿瘤，目前临床应用的经验性化疗方案缓解率仅为30%左右，大多仅能达部分缓解，而且由于肿瘤细胞异质性及多重耐药性等因素存在，使化疗效果并不理想。通过抗肿瘤药物敏感性检测，前瞻性地提出个体化化疗方案，以指导临床治疗，对提高疗效、避免不必要的毒副作用及防止肿瘤多重耐药性的发生有重要意义。
自1974年Timofeyresky在光学显微镜下观察抗癌药物对白血病细胞形态的影响以来，化疗药物敏感性检测得到了迅速发展。1971年，Park首创人肿瘤细胞集落形成药敏测试法（HTCA法），随后，其他学者又相互建立了同位素渗入法（3H-TdR法）、四唑蓝快速比色法（MTT法）、区别染色细胞毒法（Disc法）、三磷酸腺苷生物法（TAP-CSA法）和琥珀酸脱氢酶抑制试验（SDI-T法）等。MTT法利用活细胞线粒体脱氢酶能将可溶性MTT转化为蓝色衍生物亚臜（formazan)的原理，通过自动酶标仪计数来检测活细胞数量，从而评价肿瘤细胞对化疗药物的敏感性。
当前临床上常规使用的化疗药物，还难以完全杀灭肿瘤细胞，采用某些措施进一步提高化疗药物疗效，是抗肿瘤治疗的目标之一。从理论上说，细胞群体中处于增殖期的细胞越多，则该群体受细胞周期特异性化疗药物的作用越大。因此，促使G0期肿瘤细胞进入增值周期是提高肿瘤化疗疗效的一种新的尝试途径。甲硫氨酸（Met)是一种含硫氨基酸，系S-腺苷甲硫氨酸的前体，后者是甲基易位时的主要提供者，各种恶性肿瘤细胞在缺乏Met时，其代谢和增殖均受到抑制。国内外多年的研究表明［1］，Met饥饿可使大部分肿瘤细胞停滞于S期和G2M期，这就为临床上应用Met饥饿+周期特异性化疗，更有效地提高化疗药物疗效提供了一条新途径。
众多学者研究证实［2，3］，将Met--TPN分别与5-FU、DDP等药物连用时，能显著提高胃癌、乳癌等肿瘤细胞对化疗药物的敏感性。本研究结果表明：5-FU、DDP与Met-Hcy+培养基连用，对胃癌细胞生长的抑制作用较其与Met+Hcy-连用时显著（P<0.05），可提高化疗药物对胃癌细胞的杀伤作用，再次证实上述效果。推测其原因，可能系Met-Hcy+培养基能够造成肿瘤细胞的“Met饥饿”，影响蛋白质、核酸代谢，使肿瘤细胞的增值期细胞比例增多，在此阶段有针对性地使用周期特异性化疗药物，Met-Hcy+培养基可起到化疗增效剂的作用［4］，将更有效地杀伤肿瘤细胞。
Met-Hcy+培养基联合应用化疗药物5-FU、DDP，可提高对胃癌细胞的杀伤作用，为提高肿瘤化疗疗效提供了一种新的途径。
【参考文献】
1 Guo HY，Herrera H， Groce A， et al.Expression of the biochemical defect of methionine dependence in fresh patient tumors in primary histoculture.Cancer Res，1993，53：2479.
2 Hoshiya Y，Kubota T， Matsuzaki SW， et al. Methionine starvation modulates the efficacy of cisplatin on human breast cancer in nude mice.Anticancer Res，1996，16(6B)：3515-3517.
3 曹伟新，徐宁，尹浩然，等.肿瘤细胞的硫氨基酸依赖性对肿瘤化疗的作用.中华实验外科杂志，1999，16(4)：319-320.
4 欧敬民，曹伟新，朱正纲，等.去甲硫氨酸环境加化疗药物对人胃癌原代细胞生长的阻抑.肠外与肠内营养，2001，8(2)：80-83.