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日期:2006-11-23 7:23:56

快速斑点免疫渗滤试验诊断日本血吸虫病的初步研究

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快速斑点免疫渗滤试验诊断日本血吸虫病的初步研究
; 1.5.8  机测结果  每孔加50μl 2mol/L H2SO4终止反应,用DG-3022酶联免疫检测仪测定结果。样本OD值≥阴性对照2.7倍即判为阳性。
   
    2  结果
   
    2.1  6种抗原检测的敏感性  见表1、表2
                         
                                                         表1  6种抗原用于FDIFA的敏感性比较*
    
                                           

                    注:*χ2测验结果:P>0.05,差异无显著性

表2  6种抗原用于常规ELISA检测的敏感性比较*

               注:*χ2测验结果:仅雌虫组分抗原与粗抗原之间差异有显著性(P<0.05)
   
    用FDIFA检测血吸虫病人血清33份,雌虫、雄虫、虫卵3种粗抗原检测的阳性符合率分别为91%、94%、94%;3种组分抗原检测的阳性符合率分别为94%、97%、100%。同时,用ELISA法检测上述血清,结果3种粗抗原检测的阳性符合率分别为76%、94%、94%;3种组分抗原检测的阳性符合率分别为61%、97%、100%。表明FDIFA法略优于ELISA法。
   
    2.2  6种抗原检测的特异性
   
    2.2.1  6种抗原用于FDIFA的特异性比较 用6种抗原检测32份正常人血清,结果除雌虫组分抗原试验组显示3例(9.38%)假阳性外,其余5种抗原试验组均出现4例(12.50%)假阳性反应。
   
    2.2.2  6种抗原用于ELISA的特异性比较  用6种抗原检测32份正常人血清,结果均出现3例(9.38%)假阳性反应。
   
    2.2.3  6种抗原检测其他寄生虫病人血清  采用FDIFA法和ELISA法分别用6种抗原检测肝吸虫、肺吸虫及猪囊虫病人血清各5份,结果均出现1例(20%)交叉反应,即特异性为80%。因例数太少,很难说明问题。
   
    3  讨论
   
    在血吸虫病防治工作中,寻找简易、快速、准确,既具有疗效考核价值,又能用于疫情监测的免疫学诊断方法,是一个迫切需要解决的问题。以往,在常规免疫学诊断中,多以粗抗原进行试验,故特异性不尽如人意。据报道,有人对部分现有血吸虫病诊断试剂进行测试,结果都有不同程度的交叉反应或假阳性出现,尤其是与肝吸虫病、肺吸虫病、猪囊虫病之间的交叉反应更甚,因而导致部分病例被误诊,耽搁了诊断和治疗[3,4]。
   
    本研究表明:FDIFA的敏感性略好于常规ELISA,雄虫抗原好于雌虫抗原;而虫卵组分抗原则是最好的抗原,此与文献报道相一致[5]。在用ELISA法检测时,雌虫组分抗原的敏感性明显低于粗抗原,二者之间差异有显著性(P<0.05);在应用雌虫粗抗原或组分抗原进行试验时,FDIFA的敏感性则明显好于ELISA法,二者之间亦差异有显著性(P<0.05)。
   
    FDIFA与常规ELISA有相似的敏感性和特异性,不过却大大简化了操作步骤。全部操作过程可在10min内完成,且取材简便,成本低廉,无需特殊设备,其敏感性也有所提高,特别适合于基层和现场使用,具有较好的推广价值和发展前景。至于在用该法进行试验时,与其他寄生虫病(如肝吸虫病、肺吸虫病、猪囊虫病)之间存在交叉反应现象,其特异性略逊于ELISA法,既表明本法更为敏感,亦提示在其实验环节上亟待改进;同时,抗原分离、纯化方法和实验过程亦有待进一步优化。然而,按敏感性≮90%、特异性≮80%;Yauden指数(特异性/敏感性或敏感性+特异性-1)≥0.70即符合免疫诊断要求的一般规定,FDIFA法仍不失为一较好的免疫学诊断方法。

【参考文献】

    1  仇锦波,

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